在細菌(jun)學(xue)診斷(duan)工作中(zhong)，常(chang)需要(yao)從被檢(jian)材料(liao)中(zhong)分離(li)細菌(jun)，并獲得純培(pei)養（即單(dan)獨一種(zhong)細菌(jun)的(de)(de)培(pei)養物）。因此，通常(chang)要(yao)用到離(li)心機(ji)對樣品進行離(li)心分離(li)，細菌(jun)的(de)(de)離(li)心機(ji)分離(li)培(pei)養技術是細菌(jun)學(xue)診斷(duan)中(zhong)的(de)(de)一項(xiang)重要(yao)基本操作。

分離細菌的方法(fa)很多(duo)，常用的有以(yi)下(xia)幾種(zhong)。

將(jiang)被檢(jian)材料(liao)接種(zhong)于(yu)適宜培養(yang)(yang)基(ji)，再于(yu)固體培養(yang)(yang)基(ji)表(biao)面生(sheng)長的(de)菌(jun)(jun)落(luo)中(zhong)，選樣欲(yu)分離菌(jun)(jun)的(de)單個菌(jun)(jun)落(luo)，移種(zhong)于(yu)另一(yi)(yi)適宜培養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)培養(yang)(yang)。因(yin)為一(yi)(yi)個菌(jun)(jun)落(luo)通常由一(yi)(yi)個細菌(jun)(jun)生(sheng)長繁殖所形成(cheng)，故培養(yang)(yang)出(chu)的(de)細菌(jun)(jun)是單一(yi)(yi)的(de)種(zhong)類，即純培養(yang)(yang)。

用特殊的培(pei)養(yang)環境（如厭氧、二(er)氧化碳(tan)環境等）分(fen)離細(xi)菌。

將被檢材料接(jie)種子易感動(dong)物(wu)體內，使病原菌(jun)在動(dong)物(wu)體內繁殖，然(ran)后(hou)從動(dong)物(wu)體內取材料利用離(li)心(xin)機進行離(li)心(xin)分離(li)出需要的成分后(hou)培養。利用某些細菌(jun)對(dui)一些理(li)化(hua)因(yin)素有特殊抵抗力，用理(li)化(hua)方法處理(li)接(jie)種材料，殺(sha)死(si)其他微生(sheng)物(wu)而保存需要的細菌(jun)，再分離(li)培養。

一般(ban)情況(kuang)下，被檢材(cai)料用(yong)前(qian)兩(liang)種(zhong)方(fang)法(fa)分離(li)培(pei)養即可。如披撿材(cai)料污(wu)染(ran)嚴重，可先用(yong)后兩(liang)種(zhong)方(fang)法(fa)處(chu)理，再用(yong)前(qian)兩(liang)種(zhong)方(fang)法(fa)獲得純培(pei)養。

在分離培養(yang)操作中，嚴格遵守無菌操作。所有用具(ju)、培養(yang)基(ji)、試(shi)劑都(dou)要經(jing)過滅菌，而(er)且不能長(chang)時(shi)間(jian)暴露于空氣(qi)中。禁止(zhi)用手(shou)接觸或用口吹已滅菌的(de)器皿(min)內部。

根據被檢材料中(zhong)可能存在的(de)病原苗的(de)特(te)性，選擇適當的(de)培養(yang)基(ji)和(he)培養(yang)條件：（溫度(du)、氣體環境等）。進行未知菌的(de)初次分離，最(zui)好多用(yong)幾種培養(yang)基(ji)，如肉湯(tang)、鮮血瓊(qiong)脂(zhi)、麥康克瓊(qiong)脂(zhi)等，每種培養(yang)基(ji)接種數管，分別放(fang)在普(pu)通環境和(he)厭氧環境中(zhong)培養(yang)。一般經過(guo)24—78小時觀(guan)察(cha)結果，但也(ye)有一些病原菌，需要培養(yang)校(xiao)長時間才(cai)能生長。

被(bei)檢材(cai)料(liao)一般不(bu)需要處(chu)理(li)，直(zhi)接按(an)種(zhong)于培(pei)養基(ji)(ji)上。當懷疑(yi)為有芽腦(nao)的病(bing)原苗(miao)時，可將被(bei)檢材(cai)料(liao)加生(sheng)理(li)鹽(yan)水磨碎，作成1：10乳劑（液體材(cai)料(liao)不(bu)必稀釋），置60-80℃水浴中20—30分鐘(zhong)，以殺(sha)死無(wu)芽胞(bao)的雜(za)菌，然(ran)后再接種(zhong)于培(pei)養基(ji)(ji)中。